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于清宏 主任醫(yī)師 教授 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科
免疫吸附是一種利用特異性抗體與抗原相互作用的技術(shù)用于分離和純化目標(biāo)物質(zhì)的方法。該方法在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中得到了廣泛應(yīng)用。下面將詳細(xì)介紹操作步驟。
1.準(zhǔn)備材料:選擇合適的固定材料,如管壁、微孔板等,將具有特異性的抗體固定在材料上,保持抗體的活性并降低非特異性吸附。
2.樣品預(yù)處理:根據(jù)不同的樣品特性,選擇合適的處理方法,如離心、濾液、稀釋等,以獲得適宜的樣品濃度和純度。
3.樣品與探針結(jié)合:將樣品與標(biāo)記有特異性抗體的探針混合,使其發(fā)生特異性結(jié)合。探針可以選擇熒光染料、酶物質(zhì)等,用于標(biāo)記和檢測(cè)。
4.免疫復(fù)合物分離:將上述免疫復(fù)合物加入固定有抗體的材料中,通過(guò)抗原與抗體的特異性結(jié)合而吸附在材料表面。非特異性物質(zhì)會(huì)被洗掉,使目標(biāo)物質(zhì)得以分離和純化。
5.目標(biāo)物質(zhì)的洗脫:經(jīng)過(guò)免疫吸附后,目標(biāo)物質(zhì)通常會(huì)與抗體結(jié)合得較為牢固,因此需要使用適當(dāng)?shù)南疵摲椒▉?lái)使其與抗體解離。常見(jiàn)的洗脫方法包括調(diào)整酸堿度、加入特定離子、競(jìng)爭(zhēng)性抗體等。
6.目標(biāo)物質(zhì)的檢測(cè)和分析:經(jīng)過(guò)洗脫后的目標(biāo)物質(zhì)可以進(jìn)行進(jìn)一步的檢測(cè)和分析,如熒光、酶標(biāo)、質(zhì)譜等。
通常需要患者前往醫(yī)院,由專(zhuān)業(yè)醫(yī)生進(jìn)行規(guī)范操作,同時(shí)還要根據(jù)檢查結(jié)果,結(jié)合實(shí)際情況配合醫(yī)生做相關(guān)治療,并定期前往醫(yī)院做復(fù)查。
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