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尤長宣 主任醫(yī)師 南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院 腫瘤科門診
免疫組化是一種利用抗體與組織或細胞樣本中的特定抗原結(jié)合的方法，以檢測和定位這些抗原的存在和位置的實驗技術(shù)。以下是免疫組化的基本流程：
1.樣本制備：需要從組織或細胞樣本中提取蛋白質(zhì)，然后將其固定在載玻片上。
2.抗原修復：由于某些固定方法可能會導致抗原的部分或全部失活，因此需要進行抗原修復處理，以使抗原重新暴露出來。
3.阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：為了避免非特異性染色，需要阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
4.孵育一抗：將樣本與一抗孵育，一抗是一種能夠與目標抗原特異性結(jié)合的抗體。
5.孵育二抗：二抗是一種能夠與一抗結(jié)合的抗體，通常標記有酶或熒光染料。
6.顯色反應：如果使用酶標記的二抗，需要加入顯色底物，以使酶與底物反應產(chǎn)生顏色。如果使用熒光標記的二抗，則可以直接觀察熒光信號。
7.復染和封片：為了使細胞核染色，需要對樣本進行復染，然后用封片劑封片，以防止樣本干燥和褪色。
8.顯微鏡觀察：最后，可以在顯微鏡下觀察樣本，以確定目標抗原的存在和位置。
總之，免疫組化是一種非常重要的實驗技術(shù)，可以用于研究細胞和組織中的蛋白質(zhì)表達和分布，對于疾病的診斷、治療和研究具有重要的意義。
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