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聶小娟 副主任醫(yī)師 山東省立醫(yī)院 皮膚門(mén)診科
醫(yī)學(xué)上所說(shuō)的藍(lán)白斑篩選，是基因工程中比較常用的一種細(xì)菌重組子的篩選方式。一般在通過(guò)人工接入外部基因后，突變了的大腸桿菌的β半乳糖苷酶基因會(huì)被插入的外源基因切斷，導(dǎo)致不能轉(zhuǎn)化成完整的β半乳糖苷酶，所以無(wú)法對(duì)X~gal進(jìn)行再次切割，故菌落顯現(xiàn)為白色。
一、藍(lán)白斑篩選的注意事項(xiàng)：
1、實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)當(dāng)插入小片段時(shí)，重組子也有形成淺藍(lán)斑的情況.即藍(lán)色菌斑也有可能含外源基因；
2、大概有30%的假陰性. 若形成的白斑很多，但仍不是陽(yáng)性克隆，需仔細(xì)檢查你的質(zhì)粒載體和目的片段連接轉(zhuǎn)化時(shí)間溫度控制好 避免載體自連并且排除你的酶切插入位點(diǎn)等沒(méi)有出現(xiàn)設(shè)計(jì)問(wèn)題；
3、若用T載體連接，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)藍(lán)白斑，但有時(shí)出現(xiàn)全是白斑。
二、藍(lán)白斑篩選的原因：
1、X~gal涂得不夠或IPTG加得不夠。
2、顯色的時(shí)間可能不夠，延長(zhǎng)時(shí)間或放入低溫冰箱可加強(qiáng)顯色。
3、連接產(chǎn)物里面空載的載體本來(lái)就極少，這可能是主要原因。
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